當細胞所處溫度低于0°C時,細胞脫水,細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細胞內(nèi)形成冰晶,冰晶的大小對細胞的影響是不同的,大冰晶容易造成細胞膜、細胞器的損傷和破裂,故造成復蘇出來的細胞存活率、狀態(tài)等與凍存前的狀態(tài)相差甚遠。因此,我們在凍存細胞的時候會采取兩個措施,一加入低溫保護劑,二,慢凍細胞。
目前多數(shù)實驗室培養(yǎng)基滅菌后會放置水浴或者烘箱中,需使用的時候拿出來直接倒板。但培養(yǎng)基靜置時間不宜過長,靜置時間一般不超過4小時。靜置時間過長,培養(yǎng)基中瓊脂可能會少量凝固,形成類似絮狀析出。
免疫熒光(Immunofluorescence,IF)原理免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據(jù)抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應抗原(或抗體)。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)和定位,以及利用定量技術(比如流式細胞儀)測定含量。
細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。
對照品(標準品)是執(zhí)行藥品質(zhì)量標準的實物對照,是量值傳遞的重要載體,是用來檢查藥品質(zhì)量的一種特殊的專用量具、測量藥品質(zhì)量的基準、確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的物質(zhì)對照,也是作為校正測試儀器與方法的物質(zhì)標準。
“跑膠”看到這個,已經(jīng)進入實驗室學習的小伙伴想必不陌生,瓊脂糖凝膠制作膠板從而讓樣品在膠板上產(chǎn)生電泳,簡稱“跑膠”。通常跑膠分為跑瓊脂糖膠和 SDS-PAGE 膠,當然也還有非變性膠,這里主要說明上面兩種。
為了構建表達質(zhì)粒的克隆載體,必須組裝合適的啟動子,當設計真核生物的基因須在原核生物中表達式,常改用原核生物或病毒(噬菌體)基因的啟動子,而原核生物基因在真核細胞中表達時,仍可用原核生物基因的啟動子。
對照品(標準品)是執(zhí)行藥品質(zhì)量標準的實物對照,是量值傳遞的重要載體,是用來檢查藥品質(zhì)量的一種特殊的專用量具、測量藥品質(zhì)量的基準、確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的物質(zhì)對照,也是作為校正測試儀器與方法的物質(zhì)標準。
分枝桿菌的植物細胞內(nèi)帶有很多的脂類,包圍著在肽聚糖的外邊,因此分枝桿菌一般不容易上色,要歷經(jīng)加溫和增加上色時間來促進其上色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染劑融合后,就難以被酸堿性脫色劑褪色,故稱抗酸染色。
近年來對Taq-Man探針進行改良發(fā)展出TaqMan-MGB探針,在Taq-Man探針的3端加入一個能插入DNA小溝的二氫環(huán)化吲哚卟啉-三肽(DPI3),可以使大大提高探針的TM值,增加雜交反應的特異性。